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HPLC色谱柱故障排除

时间:2024-10-26 14:30:19

本文主要从:色谱柱柱压概述如何排除故障

工具/原料

普通工具:扳手等

一般溶剂:如下列举

方法/步骤

1、疳绣檩倪柱压高多少正常?同一条件:新色谱柱,C18,5µm,球形,4.6×250mm,100%甲醇,1mL/min,25℃,管路内径0.泌驾台佐3mm(0.010″),通常:<7MPa。如果柱压高了,先确认出压力升高的组件,有可能是色谱柱也可能是其他组件的原因。色谱柱污染、填料堵塞、筛板堵塞都会造成压力升高。

HPLC色谱柱故障排除

2、确定压力升高来源?保护柱-卸下保护柱,仪器堵塞-卸下色谱柱,色谱柱进口端堵塞-反方向测试(不是反冲!!)如果是色谱柱引起的柱压升高,问题是……

HPLC色谱柱故障排除

HPLC色谱柱故障排除

3、冲洗薄本窭煌色谱柱反相色谱柱(C18,C8)按照以下方式冲洗:a、水/乙腈95/5→0/100b、如下图(蓝色)如果不行,可在异丙醇里加1%TFA.使用己烷或二氯甲烷冲阊笺旦专洗色谱柱,在重新使用反相流动相以前,必须用异丙醇过渡!正相色谱柱(SiO2.Diol),以下溶剂至少各50ml冲洗色谱柱:(紫色)原则:使用比MP更强的溶剂冲洗二氯甲烷>丙醇>四氢呋喃>乙醇>乙腈>甲醇>水。那么冲洗色谱柱一定正确吗?C18柱上蛋白的冲洗:是DMSO而不是THF!!C18柱上淀粉的冲洗:是水而不是甲醇!!根据强保留污染物性质,选择合适的冲洗溶剂和程序!!

HPLC色谱柱故障排除

HPLC色谱柱故障排除

4、冲洗筛鲒队熊暨板强溶剂、反方向、低流速。反相色谱柱:水/乙腈95/5→0/100正相色谱柱:50%甲醇+50%三氯甲烷→100%乙酸乙酯-冲洗筛板不要连接检测器-不建议用户自行更换筛板

5、冲洗筛板强溶剂、反方向、低流速。反相色谱柱:水/乙腈95/5→0/100正相色谱柱:50%甲醇+50%三氯甲烷→100%乙酸乙酯-冲洗筛板不要连接检测器-不建议用户自行更换筛板

6、样品基质如何去除?制剂:淀粉、硅胶、其他添加剂中药:强疏水性成分

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