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细胞周期:DNA染色操作攻略

时间:2024-11-02 03:37:10

DNA染色是做细胞周期的重要环节,可以说染色的好坏,直接影响检测结果。

工具/原料

DNA染液,一般用PI

步骤:

1、吹打使其为细胞悬液,并且用PBS进行清洗.

细胞周期:DNA染色操作攻略

2、离心细胞,1000r/min,10min,吸走上清夜。

细胞周期:DNA染色操作攻略

3、固定细胞:加入固定buffer,15-30min,4℃。

细胞周期:DNA染色操作攻略

4、涡旋(使细胞分开),加入5mL的70-80%的乙醇到细胞中。-20℃孵育2h。

细胞周期:DNA染色操作攻略

5、清洗两次以去除乙醇。先用1X的PBS清洗,再用染液进行第二次清洗。

细胞周期:DNA染色操作攻略

6、离心细胞,10min,1000-1500r/min,吸走上清液。

细胞周期:DNA染色操作攻略

7、染色:调整细胞为10^6细胞数/test:加入0.5mL的PI/RNAse染液。

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8、室温孵育15min。

9、样品上机分析。

细胞周期:DNA染色操作攻略

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