DNA染色是做细胞周期的重要环节,可以说染色的好坏,直接影响检测结果。
工具/原料
DNA染液,一般用PI
步骤:
1、吹打使其为细胞悬液,并且用PBS进行清洗.
2、离心细胞,1000r/min,10min,吸走上清夜。
3、固定细胞:加入固定buffer,15-30min,4℃。
4、涡旋(使细胞分开),加入5mL的70-80%的乙醇到细胞中。-20℃孵育2h。
5、清洗两次以去除乙醇。先用1X的PBS清洗,再用染液进行第二次清洗。
6、离心细胞,10min,1000-1500r/min,吸走上清液。
7、染色:调整细胞为10^6细胞数/test:加入0.5mL的PI/RNAse染液。
8、室温孵育15min。
9、样品上机分析。