ImageJ这套软件不但可以计算计算细胞数,也可以定量分析DNA电泳或是Westernblot条带的灰度值。今天我们就学习一下如何分析western-blot的条带的灰度值。
工具/原料
ImageJ软件
western-blot条带灰度值分析
1、打开ImageJ软件,进入软件主页;
2、打开软件后,开启图档;
3、请先做校正,选择Analyze底下的Calibrate选项,再选择校正的模式,使用UncalibrateOD,再按ok,按下ok之后会出现校正的图形;
4、在要分析的第一条(firstlane)加上一个长型框(工具列第一个选项),再按下钽吟篑瑜Analyze/Gels/selectfirst惺绅寨瞀Lane快速键(Ctr+1),此时框架中会出现一个号码1,之后可以移动框架到第二个lane再选择Analyze/Gels/selectsecondLane快速键(Ctr+2),当然可以一直加下去,最后按Analyze/Gels/plotLanes快速键(Ctr+3)。
5、分析后会出现图型表示你刚选择的框内的影像强度,踊辽嚏囱此时可以看到有几个比较高的区段,就是我们想定量的band,使用直线工具(工具列第五个选项)先将图形中高点为有band的区域和迨藻悃顼没有band的区域分开再,使用魔术棒工具(工具列第八个选项)点选要分析的区域。
6、当我们点选分析时,在result的对话视窗会出现分析的数据,依序点选就会出现每个band的值。