树突咽疖纲掇状细胞（Dendriticcells,DC）是机体功能最强的抗原递呈细胞,能够高效摄取抗原，然后进行加工和递呈，不成熟DC具有较强的捕获抗原能力，成熟DC能够有效的激活T细胞，启动细胞免疫。
工具/原料
1640培养基，PBS,胎牛血清，细胞因子
培养皿，吸管,离心机，CO2培养箱
方法/步骤
1、从医院或者红十字会血液中心取得献血者的白细胞浓缩液。
2、无菌条件下，将血袋内的血液转移至50ml无菌离心管中，2000g离心15min。离心结束，血液分为三层：从上往下：血浆、PBMCs、和红细胞层；PBMCs细胞层作为离心样品。
3、用3ml吸管吸去上层的血浆，再吸出乳白色的PBMCs至50ml离心管中，将白色层的PBMCs（4-7ml）吸至50ml离心管中，可以尽量少吸红细胞，等体积加入室温预热的PBS溶液；
4、取一个50ml什置葆鸳离心管，加入室温预热（或37℃）的7mlFicoll-Paque(Amersham，1.077g/ml像粜杵泳)，再将样品1沿管壁小心加入至Ficoll溶液上方，800g离心30min（离心机的升速度调节为5，降速度调至0），离心结束后，50ml离心管依次分为四层：血浆、PBMCs、Ficoll层和红细胞层
5、小心将上层血浆吸去或直接吸取PBMCs细胞，在将PBMCs细胞吸至15ml无菌血清管中，加入至12ml的PBS清洗细胞，200g离心5min，重复2-3次。
6、得到PBMCs细胞后，加入2-3倍体积的RPMI-1640培养基重悬细胞，计数，并留取1×106个细胞进行HLA-A2型别鉴定
7、计数取5×105个细胞铺12孔板(根据实验要求确定需要的12孔板数楫默礤鲼目)，培养基RPMI1640含有10%FBS，37℃，笙剽茑镙5.0%CO2，培养1小时。剩余细胞按2×107cells/ml，冻存于液氮罐中
8、铺满细胞的12孔板在37℃，5.0%CO2，培养1小时后取出，吸出非贴壁细胞，收集于离心管，收集的细胞为PBLs，离心后冻存于液氮罐中
9、用预热的PBS清洗12孔板底部的贴壁细胞，吸去余下悬浮的细胞，轻轻洗细胞，重复5次诋危族枧；向贴壁的细胞加入800U/ml的hGM-CSF，（37℃，5.0鬈熵痼霄%CO2）培养至第2天，每孔吸去一半培养基，再加入等体积的室温新鲜培养基，含有100ng/mLGM-CSF和40ng/mLIL-4
10、隔天半量换液，同时补加细胞因子。第6天加50ng/mLTNF-α，继续培养两天即为成熟DC
