先来了解一下尼康落射动犍呙跳荧光显微镜Optiphot-2结构图片:
步骤一:荧光观察及开机
开启荧光电源,此时绿灯会亮起,一定要持续压着激发钮约5-10秒待橘灯亮起后或是闪烁后橘灯熄,才可放手。若是灯无法亮起,请关电源重新打开绿灯,一定要持续压着激发钮约5秒以上待橘灯亮起后,才可放手。等待约10秒橘灯再亮起,灯源才会稳定,但此时荧光汞灯尚未完全气化,要等待约10分钟后可开始使用。
将明视野卤素灯源关到最小,依据所使用之荧光染剂将相符之荧光滤片转至定位,确定shutter切到O之位置即可观察。
荧光灯源开机后至少使用30分钟,关机后距离下次开机时间最少须间隔30分钟。
使用荧光UV滤片要注意亮度,若示灯源太强,请使用ND滤片
步骤二:显微镜主机操作
打开灯源,置上标本,调整亮度。
先以4X观察(此时聚光镜要旋出),转粗调对焦,10X以上之物镜不可将聚光镜旋出。
调整瞳孔距离。
视差调整:闭左眼调右边,闭右眼调左边。
聚光镜光圈切至物镜NA值70﹪~80﹪位置。
聚光镜调整至最高位置。
光轴校正之步骤:(搬动显微镜才需做):
1.先以10倍对焦标本。
2.将视野光圈关至最小。
3.升降聚光镜至八角形最清楚。
4.视野光圈放大至接近视野。
5.若八角形不在中心,则旋转聚光镜位置调钮至最中心。
6.再将光圈稍放大比视野大即可。
物镜切换由低倍渐至高倍,4x、10x可以用粗调节轮调整,40x、100x只能以细调节轮做微调调整,如此才能避免物镜与玻片磨损造成刮伤。
40x物镜上有一圈校正环,可旋转,调整影像清晰度。
100倍物镜为油镜,使用时需滴镜油,用完后须以拭镜纸沾95﹪以上酒精多次擦拭才能干净。
若玻片有滴油,请勿以40倍物镜观察,以免镜油沾到影响观察;若沾到油,则以拭镜纸沾95﹪以上酒精多次擦拭干净即可。
步骤三:图像提取
将需提取的图像置于视野正中央,将目镜筒以顺时针方向转90度,将影像切换至相机。
在电脑打开ACT-1软件,提取图像。
此外可以参阅ACT-1软件使用手册。