凯氏定氮法是一种非常常用的测量蛋白质含氮量的方法，因其原理简单，可操作性强，准确率高。
工具/原料
消化液：H2O2：H2S04：H2O=3：2：1，粉末硫酸钾―硫酸铜混合物；K2S04与CuS04.5H20以3：1混合，30％氢氧化钠溶液，2％硼酸溶液，标准盐酸溶液(约0.01mol／L)，混合指示剂(田氏指示剂)由50mL0.1％甲烯蓝乙醇溶液与200mL0.1％甲基红乙醇溶液混合配成，棕色瓶贮存。酸性时为紫红色，碱性时为绿色。变色范围很窄且灵敏，待测样品
1.凯氏烧瓶2.凯氏定氮仪3.分析天平4.酸式滴定管5.烘箱6.消化炉7.容量瓶等等
方法/步骤
1、消化前样品处理*固体样品:某一固体样品中的含氮量是用100g该物质(干重)中所含氮的g数来表示(％)。*固体样品105℃烘干至恒重。用坩埚钳将称量瓶放人干燥器内，待降至室温后称重，按上述操作继续烘干样品。每干燥1小时后，称重一次，直到两次称量数值不变，即达恒重。*若样品为液体(如血清等)，可取一定体积样品直接消化测定。
2、消化*取凯氏烧瓶钿泼兽匿标号。各加几颗玻璃珠;*1及2号瓶中各加样品0.1g，催化剂200mg，消化液5mL。3及4号瓶中各加相同量的催化剂和消化液-----对照，以测定试剂中可惮我鸷截能含有的微量含氮物质。消化开始时应控制火力，不使液体冲到瓶颈。待瓶内水汽蒸完，硫酸开始分解并放出SO2白烟后，适当加强火力消化，直至消化液呈透明淡绿色。*定容：冷却后，加蒸馏水(慢加，随加随摇)。将瓶中液体倾入50mL或100mL容量瓶，并以蒸馏水洗烧瓶数次，洗液并入容量瓶，定容。
3、蒸馏吸收：改进型凯氏定氮仪*特点：将蒸汽发生器、蒸馏器和冷凝器组成一个整体，体积小水貔藻疽，安装容易，操作简便。1)水蒸汽发生器裘沲谡迹和反应室2)冷凝器和通气室3)排水柱*关键：搞清水管系统【*蒸馏器的洗涤：１.接通冷凝水，向蒸汽发生器中加入一定量的水(以排水口高度为宜)，酒精灯加热烧开。２.水的自动喷出：将蒸馏水从加样室加入反应室将酒精灯移开片刻，反应室内水自动喷出到蒸汽发生器打开蒸汽发生器出水口，放水。如此反复清洗3-5次。３.清洗后在冷凝管下端放一锥形瓶盛有5mL，2％硼酸溶液和1～2滴指示剂的混合液。如不变色则表明蒸馏装置内部已洗涤干净。】
4、蒸馏吸收准备:取50mL锥形瓶3个，各加入5mL硼酸溶液和1滴指示剂，溶液呈幕契箔熔淡紫色，表面皿覆盖秽栉伫钒备用。关闭冷凝水，打开自由夹，使蒸汽发生器与大气相通。将锥形瓶放在冷凝器下，冷凝器下端浸没在液体内。加样:移液管取3mL消化液（空白液和样品消化液分别做），加入反应室，用小量筒加NaOH溶液5mL，关闭自由夹，少量水封口。蒸馏:关闭自由夹，打开冷凝水。点燃酒精灯，蒸馏开始，锥形瓶中溶液由淡紫色变绿时(约2-3分钟)开始计时，蒸馏3分钟，移开锥形瓶，使冷凝器下端离开液面约1cm，继续蒸馏1分钟，取下锥形瓶，表面皿覆盖。蒸馏完毕后，应立即清洗反应室，方法如前所述。重复3次。最后将自由夹同时打开，将蒸汽发生器内的全部废水换掉，继续下一次蒸馏。
5、滴定全部蒸馏完毕后，用标准盐酸溶液滴定各锥形瓶中收集的氨量，硼酸指示剂溶液由绿变淡紫色为滴定终点。注意：使用前检查酸式滴定管漏不漏？漏的话，涂凡士林滴定时一边滴一边摇，防止滴定过头！及时记录读数要求：空白液1次，样品消化液2次
6、计算（公式在图片中）c为标准盐酸溶液摩尔浓度(0.0098M)；V1为滴定样品消化液用去的盐酸溶液平均mL数；V2为滴定空白液用去的盐酸溶液mL数；w为样品重量(1g)。14为氮的相对量子质量。消化液总量500ml,蒸馏时消化液用量3ml样品蛋白质含量(％)=总氮量×6.25
